Анализ препаратов, вызывающих лекарственную зависимость, методом ЖХ-МС с использованием Agilent Poroshell HPH C18

В данных методических рекомендациях рассмотрен анализ нескольких соединений, относящихся к препаратам, вызывающим лекарственную зависимость, методом ЖХ-МС с использованием универсальной градиентной методики и масс-спектрального детектирования с ионизацией распылением в электрическом поле в режиме положительных ионов (ESI+) при высоких и низких значениях рН подвижной фазы. Обычно предполагается, что зарядовое состояние молекул аналита зависит от значения рН подвижной фазы. При этом эффективность ионизации в методе ЖХ-МС с ионизацией распылением в электрическом поле в режиме положительно заряженных ионов будет значительно ниже при использовании подвижных фаз с высоким значением рН вследствие перехода соединений в незаряженные формы. Однако многие исследователи в процессе изучения различных видов проб (включая белки, пептиды и аминокислоты) обнаруживали отсутствие эффекта от увеличения рН подвижной фазы или даже увеличение чувствительности [1–6]. Использование подвижных фаз с высоким значением рН не подавляет ионизацию основных соединений при ионизации распылением в электрическом поле в режиме положительных ионов. Положительно заряженных ионов образуется достаточно много, а полученные сигналы аналита при использовании подвижных фаз с высоким рН часто даже лучше, чем в случае кислотных подвижных фаз с низким рН. Это важное заключение позволяет распространить применение универсальных методик элюирования на анализ полярных основных соединений, в отношении удерживания которых ранее встречались затруднения.

Однако, как было показано, многие из тех условий хроматографического разделения, которые могут быть использованы при высоких значениях рН, оказывают вредное воздействие на стандартные колонки для ВЭЖХ с сорбентами на основе силикагеля. Использование новых колонок Agilent Poroshell HPH C18, которые устойчивы к средам с высоким значением рН, позволяет регулировать селективность и чувствительность за счет контроля значения рН без сокращения срока службы колонки при повышенных величинах рН. Колонки с поверхностно-пористыми частицами находят все более широкое применение благодаря высокой эффективности и скорости. Исследователи теперь могут использовать растворы с более широким диапазоном значений рН при разработке хроматографических методик, использующих такие колонки.