Быстрая эксклюзионная хроматография высокого разрешения применительно к агрегатам в биотерапевтических средствах

Агрегация белков является важным показателем качества для биотерапевтических белков, поскольку агрегаты могут оказывать существенное влияние на безопасность и вызывать антигенный ответ [1]. Агрегаты могут также снижать эффективность биопрепаратов и значительно ухудшать экономические показатели процесса. Белки часто агрегируют под воздействием стрессовых условий, таких как изменения рН, температуры или концентрации. Следовательно, агрегация может происходить на многих этапах производства. Эксклюзионная хроматография (SEC) признана предпочтительным методом для количественного анализа агрегатов.

Контроль образования агрегатов в процессе разработки биотерапевтического средства, например во время выбора клеточного клона или оптимизации условий ферментации с использованием строгого подхода к планированию экспериментов, может привести к необходимости анализа огромного количества проб методом эксклюзионной хроматографии.

При тех условиях, которые обычно используются для эксклюзионной хроматографии, время анализа составляет не менее 20 минут, что сильно ограничивает возможность выполнения анализа большого количества проб. Компания Agilent разработала колонки AdvanceBio SEC с хорошо оптимизированными размерами частиц и пор, которые обеспечивают более быстрое разделение и существенно ослабляют это аналитическое ограничение. В настоящих методических рекомендациях описываются способы увеличения пробопотока без снижения точности анализа.